Spektrofotometri U.V

            Pengukuran absorbansi atau transmitasi dalam spektoskopi ultraviolet digunkan untuk analisi kualitatis dan kuantitatif spesies kimia. Spektroskopi absorpsi berguna untuk mengkarakterisasikan gugus fungsi dalam suatu molekul untuk analisi kuantitatif. Absorpsi terjadi didalam daerah UV vakum (< 185 mm). Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spektofotometer dan fotometer. Spektofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditrnasmisikan atau yang diabsorpsi. Jadi spektrofotometer digunakan untuk mengukur energy secara relative jika energy tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang (Khopkar,1990).

            Pada spektrofotometer, panjang gelombang yang benar-benar terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya seperti prisma. Suatu spektrofotmeter tersusun dari sumber spektrum tampak yang kontinyu, monokromator, sel pengabsorpsi untuk larutan sampel atau blangko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorpsi antara sampel dan blangko atau pembanding (Khopkar, 1990).

            Cara kerja spektrofotometer secara singkat adalah sebagai berikut. Tempat pembanding, misalnya blangko dalam sel pertama sedangkan larutan yang akan dianalisis pada sel kedua. Kemudian pilih fotosel yang cocok 200 nm-650 nm (650 nm-1100 nm) agar daerah Ϡ yang diperlukan dapat terliputi. Dengan ruang fotosel dalam tertutup  “nol” galvanometer di dapat dengan memutar tombol sensitivitas. Dengan menggunakan tombol transmitansi, kemudian atur besarnya pada 100%. Lewatkan berkas cahaya pada larutan sampel yang akan dianalisis. Skala absorbs menunjukkan absorbansi larutan sampel (Khopkar,1990).

            Pengukuran dilakukan pada masing-masing larutan pada dua panjang gelombang, sehingga diperoleh dua persamaan hubungan antara absorpsi dengan konsentrasi pada dua persamaan hubungan antara absorpsi dengan konsentrasi pada dua panjang gelombang, akibatnya konsentrasi masing-masing komponen dapat di hitung (Khopkar,1990).